[九师联盟]2025~2026学年高三核心模拟卷(上)·(二)2生物A试题

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（3）细胞在分化过程中，细胞核中的DNA甲基化、组蛋白甲基化及乙酰化等多种表观遗传修饰会抑制细胞核中相关基因的表达。研究显示，重构胚中基因A的正常表达是克隆成功的关键。图1中将Kdm4d的mRNA注入重构胚和用TSA处理重构胚后，能激活重构胚，使其完成细胞分裂和发育进程的机制可能是20．（12分）含镍（Ni）工业废水的处理一直是水污染治理的难题。一类广泛存在于动物肝脏细胞中的金属结合蛋白（MT）具有结合Ni等重金属，并消除重金属对细胞毒害作用的能力。研究者利用MT基因构建转基因大肠杆菌，用以净化工业废水。（1）为获取目的基因，从中提取mRNA，通过法获得MTcDNA。MTcDNA的碱基序列与细胞中MT基因的碱基序列（填“相同”或“不同")。（2）为了提高工程菌MT蛋白的产量，将MT基因与外源表达增强元件连接（图1表示引物对应的位置）。利用PCR检测连接是否成功，可选择的引物组合是(填字母)。引物1引物3表达增强元件MT基因引物2引物4图1 答案解析网（3）将改造后的目的基因进行PCR扩增，得到的片段末端为末端，由于载体E只有能产生黏性末端的酶切位点，需借助中间载体P将M基因接入载体E。载体P和载体E的酶切位点及相应的酶切序列如图2乙所示。启动子乙Xho IXho I复制原点EcoRV复制原点EcoRVLacZ基因Pst I Kpn IPst I载体P载体ESma I终止子氨青霉素卡那霉素抗性基因抗性基因答案解析网——CTCGAG—— ——GATATC —— ——CTGCAG—— —— CCCGGG —— ——GGTACC -—GAGCTC-—CTATAG——GACGTC—— GGGCCC -CCATGG-TT↑Xho IEcoRVPst ISmaIKpnI答案解析网图2答案解析网注：LacZ基因编码产生的酶能分解X-gal而产生蓝色物质，使菌落呈现蓝色，否则菌落为白色。①选用酶将载体P切开，再宜选用（选填“T4DNA”或“E.coliDNA”）DNA连接酶将M基因与载体P相连，构成重组载体P'。②载体P不具有表达M基因的启动子和终止子，应该选用酶组合对载体P'和载体E进行酶切，将切下的M基因和载体E用DNA连接酶进行连接，将得到的混合物导入到用处理的大肠杆菌完成转化。③上述所得大肠杆菌不一定是成功导入MT基因的工程菌，为筛选出成功导入MT基因的工程菌，请提供一个实验设计思路：国考1号9·12月卷1·生物学第8页（共8页)